Mindy 2007-5-17 11:22 AM
谁做实验用过除草剂？
有谁做实验用过basta? 浓度是多大啊？
我现在用的是recommended concentration, 但是植物被我统统喷死了。
我从arabidopsis长出两片叶子时开始喷，隔两天喷两盆，直到长出第5和6片叶子时。 但是通通死掉了。
Nirvana 2007-5-17 11:47 AM
我没做过这样的实验.
但是你可以参照2,4-D的浓度. 这个东西应该不贵. 做个浓度梯度不难吧
另外推荐的浓度从哪里来的? 是从人家paper里来的还是药物说明自带的?
要是药物自带应该指的是致死浓度吧
Mindy 2007-5-17 11:48 AM
[quote]原帖由 [i]Nirvana[/i] 于 2007-5-17 10:47 AM 发表
我没做过这样的实验.
但是你可以参照2,4-D的浓度. 这个东西应该不贵. 做个浓度梯度不难吧
另外推荐的浓度从哪里来的? 是从人家paper里来的还是药物说明自带的?
要是药物自带应该指的是致死浓度吧 [/quote]
自带的。什么叫致死浓度？就是说“死定了”？
Mindy 2007-5-17 11:48 AM
2,4-D的浓度
什么意思？
Nirvana 2007-5-17 11:50 AM
2,4-D是最常用的一种植物除草剂
会影响很多细胞和生理过程
很多paper用这个药物研究细胞生长和发育.....
顺便问一下, 你原来是学生物的吗?.....
[quote]原帖由 [i]Mindy[/i] 于 2007-5-17 10:48 AM 发表
2,4-D的浓度
什么意思？ [/quote]
Mindy 2007-5-17 11:58 AM
[quote]原帖由 [i]Nirvana[/i] 于 2007-5-17 10:50 AM 发表
2,4-D是最常用的一种植物除草剂
会影响很多细胞和生理过程
很多paper用这个药物研究细胞生长和发育.....
顺便问一下, 你原来是学生物的吗?.....
[/quote]
BS biotech, MS Plant Biology
我用basta筛选plant transformants. 两盆里有一盆是对照，应该全活的。结果全都死了。:han2
Nirvana 2007-5-17 01:36 PM
减少basta浓度
另外还可能transform不成功或者transform之后表达有问题
你有其他transform成功的line吗? 可以用这个先试试basta浓度梯度.
[quote]原帖由 [i]Mindy[/i] 于 2007-5-17 10:58 AM 发表
BS biotech, MS Plant Biology
我用basta筛选plant transformants. 两盆里有一盆是对照，应该全活的。结果全都死了。:han2 [/quote]
Mindy 2007-5-17 04:06 PM
[quote]原帖由 [i]Nirvana[/i] 于 2007-5-17 12:36 PM 发表
减少basta浓度
另外还可能transform不成功或者transform之后表达有问题
你有其他transform成功的line吗? 可以用这个先试试basta浓度梯度.
[/quote]
对对，transform之后表达，我差点没想到。这个按我现在的做法，没两天喷新的一盆，应该是没有问题吧？
还有，我转的9个基因用的是同一个promoter,表达上有没有同时的说？
我的control应该是成功的line,从别人那里拿来的，但是用它没试出来。6
Mindy 2007-5-17 04:28 PM
这个basta抗性的表达受不受我转的基因的影响？
hoshikame 2007-5-17 05:04 PM
[quote]原帖由 [i]Mindy[/i] 于 2007-5-17 03:28 PM 发表
这个basta抗性的表达受不受我转的基因的影响？ [/quote]
这个要问你啊 :P
Mindy 2007-5-17 05:13 PM
[quote]原帖由 [i]hoshikame[/i] 于 2007-5-17 04:04 PM 发表
这个要问你啊 :P [/quote]
我等你LG来回答滴
他有没有查啊？
hoshikame 2007-5-17 05:14 PM
[quote]原帖由 [i]Mindy[/i] 于 2007-5-17 04:13 PM 发表
我等你LG来回答滴
他有没有查啊？ [/quote]
他从来不上这里滴,也没有id~
汗...
Mindy 2007-5-17 05:16 PM
[quote]原帖由 [i]hoshikame[/i] 于 2007-5-17 04:14 PM 发表
他从来不上这里滴,也没有id~
汗... [/quote]
帮我提醒一下行不？
老板又催我再做一组，我的working material马上就没了:cry:
Nirvana 2007-5-17 05:31 PM
我从来没有喷洒的方法筛选过transformed plants
不可以用培养基吗?
你说control没有试出来是指都死了? 可以先做一个PCR看看是否真是的transformed的, 如果是就用这个line来试不同的浓度直到可以存活, wild type control不能存活时, 就用这个浓度来筛选你的transformed的plants
[quote]原帖由 [i]Mindy[/i] 于 2007-5-17 03:06 PM 发表
对对，transform之后表达，我差点没想到。这个按我现在的做法，没两天喷新的一盆，应该是没有问题吧？
还有，我转的9个基因用的是同一个promoter,表达上有没有同时的说？
我的control应该是成功的line, ... [/quote]
Nirvana 2007-5-17 05:37 PM
我大概知道你是谁了, 我参加了你们的婚礼是不是?
[quote]原帖由 [i]hoshikame[/i] 于 2007-5-17 04:14 PM 发表
他从来不上这里滴,也没有id~
汗... [/quote]
Mindy 2007-5-17 05:37 PM
[quote]原帖由 [i]Nirvana[/i] 于 2007-5-17 04:31 PM 发表
我从来没有喷洒的方法筛选过transformed plants
不可以用培养基吗?
你说control没有试出来是指都死了? 可以先做一个PCR看看是否真是的transformed的, 如果是就用这个line来试不同的浓度直到可以存活, wild typ ... [/quote]
要是真到了万不得已，也只能PCR了。
我听说有种kit直接煮新鲜叶子就可以做PCR了，不用提DNA. 你用过这种kit吗？我们lab都是用的biolab的残品，catalog好像没有这个东东
Mindy 2007-5-17 05:38 PM
[quote]原帖由 [i]Nirvana[/i] 于 2007-5-17 04:37 PM 发表
我大概知道你是谁了, 我参加了你们的婚礼是不是?
[/quote]
我都回过贴啊，她是ZY, 她老公是LMM
Mindy 2007-5-17 05:46 PM
[quote]原帖由 [i]hoshikame[/i] 于 2007-5-17 04:14 PM 发表
他从来不上这里滴,也没有id~
汗... [/quote]
你LG好厉害啊，我终于搞明白了。。。
狂赞！！！:haocool
Mindy 2007-5-17 07:03 PM
又喷了除草剂，高高兴兴回家了。。。。
hoshikame 2007-5-18 02:59 PM
[quote]原帖由 [i]Nirvana[/i] 于 2007-5-17 04:37 PM 发表
我大概知道你是谁了, 我参加了你们的婚礼是不是?
[/quote]
是啊,汗...